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干細胞是一類具有自我復(fù)制能力的多潛能細胞，培養(yǎng)環(huán)境無毒和無菌室保證培養(yǎng)細胞生存是建設(shè)干細胞實驗室的重要條件。博泰小編帶大家了解干細胞實驗室平面布局規(guī)劃設(shè)計要求有哪些。
一、干細胞實驗室平面布局原則
干細胞實驗室布局應(yīng)符合人、物分流，潔、污分流的原則，整個實驗室分為潔凈區(qū)和非潔凈區(qū)。潔凈區(qū)與非潔凈區(qū)之間人流通過更衣緩沖系統(tǒng)進入，物流通過傳遞窗傳遞。
二、干細胞實驗室的人流物流
1、人流：實驗室人員通過更衣緩沖進入核心實驗區(qū)，做完實驗之后通過退更緩沖退出實驗室。若實驗室設(shè)置陽性細胞制備間，應(yīng)設(shè)置獨立退出通道。
2、物流：干細胞實驗室物品流分為樣本流、潔凈物品流、污物流。樣本在樣本接收間通過傳遞窗進入實驗區(qū)后，在樣本處理間進行樣本前處理。
三、干細胞實驗室平面布局
1、潔凈區(qū)
（1）更衣緩沖：更衣緩沖區(qū)通常按照緩沖、一更、二更、緩沖的流程布置。與外走廊連接的緩沖間為非潔凈區(qū)，實驗人員通過一更、二更、緩沖之后進入實驗室潔凈走廊。
（2）細胞制備：細胞制備區(qū)是整個干細胞實驗室的核心區(qū)域，其功能包括但不限于細胞的富集、分離純化、擴增、凍存、功能性細胞定向分化等。
（3）培養(yǎng)：干細胞實驗室的細胞培養(yǎng)可在細胞制備間進行，可在潔凈區(qū)設(shè)置單獨的細胞培養(yǎng)間，放置若干臺培養(yǎng)箱，不同批次的干細胞不應(yīng)同時在同一個培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。
（4）制劑：制劑室也叫配液室，用于干細胞制劑的配制和灌裝或分裝等操作。制劑室的實驗設(shè)備包括潔凈工作臺/生物安全柜、4℃醫(yī)用冰箱等。
（5）微生物檢測：微生物檢測區(qū)的平面布局按照微生物實驗室的要求設(shè)計，包含準備間、無菌室、陽性對照室及儲存室、洗消室等配套設(shè)施。
（6）細胞研發(fā)實驗室：該區(qū)域根據(jù)客戶要求設(shè)置，用于細胞治療產(chǎn)品的研發(fā)、質(zhì)檢。
2、非潔凈區(qū)
（1）樣本接收區(qū)：樣本接收區(qū)宜臨近電梯，方便送樣人員送樣。
（2）物料存放區(qū)：存放實驗所需的物品，如耗材、培養(yǎng)基、試劑等。
（3）輔助功能間：清洗滅菌室、污物暫存室、氣瓶間、數(shù)據(jù)中心、檔案室、辦公室等。
（4）細胞儲存區(qū)：細胞儲存區(qū)需放置若干個液氮儲存罐、超低溫冰箱，需要較大空間。
（5）質(zhì)量檢測區(qū)：質(zhì)檢區(qū)設(shè)置免疫檢測區(qū)、細胞生物學(xué)檢測區(qū)、理化檢測區(qū)，可用于樣本檢測和細胞成品的質(zhì)量檢測。

實驗室設(shè)計
細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術(shù)，要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細胞培養(yǎng)實驗室設(shè)計原則一般是無菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動的內(nèi)側(cè)，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。
常用設(shè)施及設(shè)備
(1)超凈工作臺：也稱凈化工作臺，分為側(cè)流式，直流式和外流式三大類。
(2)無菌操作間：一般由更衣間，緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱，離心機，倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱，冷藏器及消毒好的無菌物品等。
(3)操作間：普通培養(yǎng)箱，離心機，水浴鍋，定時鐘，普通天平及日常分析處理物。
(4)洗刷消毒間：烤箱，消毒鍋，蒸餾水處理器及酸缸等。
(5)分析間：顯微鏡，計算機及打印機等。
培養(yǎng)器皿
常用細胞培養(yǎng)器皿有培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)板，培養(yǎng)皿等。常準備量是使用量的三倍，器皿應(yīng)選擇透明度好，無毒，利于細胞粘附和生長的材料，常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。常用的器皿有下面幾種：
(1)液體儲存瓶：用于儲存各種配制好的培養(yǎng)液，血清等液體，常用規(guī)格有500ml，250ml， 100ml等幾種.
(2)培養(yǎng)瓶：根據(jù)培養(yǎng)細胞種類要求不同培養(yǎng)瓶的形態(tài)各異，用于細胞傳代培養(yǎng)的細胞要求瓶壁厚簿均勻，便于細胞貼壁生長和觀察，瓶口要大小一致，口徑一般不小于1cm，允許吸管伸入瓶內(nèi)任何部位,規(guī)格有200ml，100ml，50ml，25ml，10ml等幾種。
(3)培養(yǎng)皿：用于開放式培養(yǎng)及其它用途，分直徑30mm，60mm，120mm等幾種。
(4)吸管：常用的有長吸管和短吸管兩類，長吸管也稱刻度吸管。其改良后管上部有球型刻度稱改良吸管,刻度吸管用于移動液體。常用1ml和10ml兩種，短吸管也叫滴管，分彎頭和直頭兩種。
(5)離心管：離心管是細胞培養(yǎng)中使用廣泛的器皿，根據(jù)用途不同形態(tài)各樣，常用于細胞培養(yǎng)的離心管有大腹式尖底離心管和普通尖底離心管兩類.前者分別為50ml，30ml，15ml；后者則多為10ml和5ml。
（6）其它：如三角燒瓶，燒杯，量筒，漏斗，注射器等。
細胞培養(yǎng)溫度
維持培養(yǎng)細胞旺盛生長，必須有恒定而適宜的溫度。不同種類的細胞對培養(yǎng)溫度要求也不同。
人體細胞培養(yǎng)的標準溫度為36.5℃±0.5℃，偏離這一溫度范圍，細胞的正常代謝會受到影響，甚至死亡。
培養(yǎng)細胞對低溫的耐受力較對高溫強，溫度上升不超過39℃時，細胞代謝與溫度成正比；人體細胞在39-40℃1小時，即能受到一定損傷，但仍有可能恢復(fù)；在40-41℃1小時，細胞會普遍受到損傷，僅小半數(shù)有可能恢復(fù)；41-42℃1小時，細胞受到嚴重損傷，大部分細胞死亡，個別細胞仍有恢復(fù)可能；當(dāng)溫度在43℃以上1小時，細胞全部死亡。
相反，溫度不低于0℃時，對細胞代謝雖有影響，,但并無傷害作用；把細胞放入25-35℃時，細胞仍能生存和生長，但速度減慢；放在4℃數(shù)小時后，再回到37℃培養(yǎng)，細胞仍能繼續(xù)生長。
細胞代謝隨溫度降低而減慢。當(dāng)溫度降至冰點以下時，細胞可因胞質(zhì)結(jié)冰受損而死亡。但是，如果向培養(yǎng)液中加入一定量的冷凍保護劑(二甲亞砜或甘油)，可在深低溫下如-80℃或-196℃(液氮)長期保存。
合適的氣體環(huán)境
氣體是哺乳動物細胞培養(yǎng)生存必需條件之一，所需氣體主要有氧氣和二氧化碳。
氧氣參與三羧酸循環(huán)，產(chǎn)生供給細胞生長增殖的能量和合成細胞生長所需用的各種成分。
開放培養(yǎng)時一般把細胞置于95%空氣加5%二氧化碳混合氣體環(huán)境中。二氧化碳既是細胞代謝產(chǎn)物，也是細胞生長繁殖所需成分，它在細胞培養(yǎng)中的主要作用在于維持培養(yǎng)基的pH值。
大多數(shù)細胞的適宜pH為7.2-7.4，偏離這一范圍對細胞培養(yǎng)將產(chǎn)生有害的影響。但細胞耐酸性比耐堿性大一些，在偏酸環(huán)境中更利于細胞生長。但有一些細胞也喜歡偏堿環(huán)境中生長，如成纖維細胞適合pH是7.4-7.6。每種細胞都有其適pH值。

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