PCR實驗室設(shè)計原則.得創(chuàng)實驗室工程專業(yè)從事PCR實驗室工程規(guī)劃，設(shè)計，施工一條路凈化工程公司，歡迎來電咨詢：027-82289886
我們之前碰到過一些客戶，說做PCR實驗總是出現(xiàn)假陽性，明明沒有加模板最后卻擴出了產(chǎn)物。如果這種現(xiàn)象頻頻出現(xiàn)，就要注意一下操作環(huán)境了。如果你去百度上搜索“PCR出現(xiàn)假陽性了怎么辦”，下面給出的建議一定會有防止交叉污染這條建議。有人說模板DNA是大分子，溶于去離子水中，怎么會無緣無故跑出來污染環(huán)境呢？小編將會一一解釋。

位置的選擇應(yīng)根據(jù)以下要求和技術(shù)經(jīng)濟方案的比較確定:
1、應(yīng)在大氣含塵濃度較低、自然環(huán)境較好的地區(qū)；
2、應(yīng)遠(yuǎn)離鐵路、碼頭、機場、交通動脈、工廠、倉庫、堆場等嚴(yán)重空氣污染、振動或噪聲干擾區(qū)域，如不遠(yuǎn)離嚴(yán)重空氣污染源，應(yīng)位于最大風(fēng)向風(fēng)側(cè)，或全年最小風(fēng)向風(fēng)側(cè)；
3、應(yīng)布置在廠區(qū)內(nèi)環(huán)境清潔、人流不穿越或少穿越的地區(qū)。
對于具有微振動控制要求的潔凈廠房的位置選擇，應(yīng)實際測量周圍現(xiàn)有振源的振動影響，并分析比較精密設(shè)備和精密儀器的允許環(huán)境振動值。
實驗室與煙囪之間的水平距離不應(yīng)小于煙囪高度的12倍。
實驗室與交通干道之間的距離不宜小于50米。
實驗室周圍應(yīng)設(shè)置環(huán)形消防車道(可使用交通道路)。如有困難，可沿廠房兩條長邊設(shè)置消防車道。
實驗室周圍的路面，應(yīng)選用整體性好、灰塵少的材料。
實驗室周圍應(yīng)進行綠化。可以種植草坪，種植對大氣中粉塵濃度沒有有害影響的樹木，形成綠化社區(qū)，但不能阻礙消防作業(yè)。

PCR實驗室分區(qū)及區(qū)域功能
PCR實驗室分為四個區(qū)域，進?各?作區(qū)域必須嚴(yán)格按照單??向進?，不同的?作區(qū)域使?不同的?作服（例如不同的顏
?）。?作?員離開各?作區(qū)域時，不得將?作服帶出，四區(qū)域分別為：1.試劑配制區(qū)2.樣品處理區(qū)3.核酸擴增區(qū)4.產(chǎn)物分析區(qū)如使?全?動分析儀，區(qū)域可適當(dāng)合并,三四區(qū)可合并為擴增產(chǎn)物分析。
各區(qū)的功能：完備的實驗室配套設(shè)施是保證實驗?作的必要條件，應(yīng)根據(jù)各個實驗室實驗內(nèi)容的不同配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器，如超凈?作臺、離?機、加樣器等。
PCR實驗室并沒有嚴(yán)格的凈化要求，但是為避免各個實驗區(qū)域間交叉污染的可能性，宜采?全送全排的?流組織形式。同時，要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的?例以保證各實驗區(qū)的壓?要求。
1、試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū) 該實驗區(qū)主要進?的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和?于標(biāo)本制作的材料應(yīng)直接運送?該區(qū)，不得經(jīng)過其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。 對與?流壓?的控制，本區(qū)并沒有嚴(yán)格的要求。
2、標(biāo)本制備區(qū) 該區(qū)域主要進?的操作為臨床標(biāo)本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加??擴增反應(yīng)管和測定RNA時 DNA的合成。本區(qū)的壓?梯度要求為：相對于鄰近區(qū)域為正壓，以避免從鄰近區(qū)進?本區(qū)的?溶膠污染。另外，由于在加樣操作中可能會發(fā)??溶膠所致的污染，所以應(yīng)避免在本區(qū)內(nèi)不必要的?動。
擴增反應(yīng)混合物配制和擴增區(qū) 該區(qū)域主要進?的操作為DNA或DNA擴增。ft外，已制備的DNA模板和合成的DNA(來?樣本制備區(qū))的加?和主反應(yīng)混合液(來?試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進?。在巢式PCR測定中，通 常在第?輪擴增后必須打開反應(yīng)管，因ft巢式擴增有較?的污染危險性，第?次加樣必須在本區(qū)內(nèi)進?。 本區(qū)的壓?梯度要 求為：相對于鄰近區(qū)域為負(fù)壓，以避免?溶膠從本區(qū)漏出。為避免?溶膠所致的污染，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的?動。個別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺內(nèi)進?。
4、擴增產(chǎn)物分析區(qū)該區(qū)域主要進?的操作為擴增?段的測定。如使?全?動封閉分析儀器檢測，ft區(qū)域可不設(shè)。本區(qū)是最主要的擴增產(chǎn)物污染來源，因ft對本區(qū)的壓?梯度的要求為：相對于鄰近區(qū)域為負(fù)壓，以避免擴增產(chǎn)物從本區(qū)擴散?其它區(qū)域。
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PCR實驗室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計及壓力控制
PCR實驗室沒有嚴(yán)格的凈化要求，但為了避免各實驗區(qū)之間交叉污染的可能性，應(yīng)采用全送全排的氣流組織形式。同時，應(yīng)嚴(yán)格控制輸送和排氣的比例，以確保每個試驗區(qū)的壓力要求。
3.1.試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)域
實驗區(qū)的主要操作是儲存試劑的制備、試劑的包裝和主要反應(yīng)混合物的制備。用于標(biāo)本生產(chǎn)的試劑和材料應(yīng)直接運輸?shù)皆搮^(qū)域，不得通過其他區(qū)域。試劑原料必須儲存在該區(qū)域，并制備所需的儲存試劑。
對個區(qū)域?qū)饬鲏毫Φ目刂茮]有嚴(yán)格的要求。
3.2標(biāo)本制備區(qū)
該地區(qū)的主要操作是保存臨床標(biāo)本和核酸(RNA、DNA)提取、存儲和添加到擴增反應(yīng)管和測定RNA時DNA的合成。
該區(qū)域的壓力梯度要求為：相對于相鄰區(qū)域的正壓，以避免從相鄰區(qū)域進入該區(qū)域的氣溶膠污染。此外，由于在樣品添加過程中可能會發(fā)生氣溶膠污染，因此應(yīng)避免在該區(qū)域不必要的行走。
3.3.擴增反應(yīng)混合物的制備和擴增區(qū)域
該區(qū)域的主要操作是DNA或DNA擴大。此外，已制備的DNA合成模板DNA(來自樣品制備區(qū))添加和主反應(yīng)混合物(來自試劑儲存和制備區(qū))制備反應(yīng)混合物也可在本區(qū)進行。PCR在測量中，反應(yīng)管通常必須在第一輪擴增后打開，因此巢式擴增具有較高的污染風(fēng)險，第二次加樣必須在該區(qū)域進行。
該區(qū)域的壓力梯度要求為：相對于相鄰區(qū)域的負(fù)壓，以避免氣溶膠從該區(qū)域泄漏。為了避免氣溶膠造成的污染，應(yīng)盡量減少在該地區(qū)不必要的行走。應(yīng)在超平臺上進行個別操作，如添加樣品。
3.4擴大產(chǎn)品分析區(qū)域
該區(qū)域的主要操作是測量擴增片段。如果使用全自動封閉分析儀進行檢測，則不能設(shè)置該區(qū)域。
該區(qū)域是擴增產(chǎn)物污染的主要來源，因此該區(qū)域的壓力梯度要求為：相對于相鄰區(qū)域的負(fù)壓，以避免擴增產(chǎn)物從該區(qū)域擴散到其他區(qū)域。
4預(yù)防和控制污染
PCR實驗室規(guī)劃設(shè)計的核心問題是如何避免污染。在實踐中，有幾種常見的污染類型：擴大產(chǎn)物污染；自然基因組DNA污染；試劑和標(biāo)本之間的污染。一旦發(fā)生污染，必須停止實驗，直到找到污染源，實驗結(jié)果必須無效，需要重新進行實驗。因此，在污染發(fā)生后，在實驗室周圍尋找污染源不僅需要時間和繁瑣，而且浪費人力和物力資源。因此，為了避免污染，首先應(yīng)該是預(yù)防，而不是排除。

武漢得創(chuàng)凈化技術(shù)有限公司，坐落于湖北省武漢市，公司下配有凈化工程部、清潔產(chǎn)品部、凈化設(shè)備部。經(jīng)營范圍包含半導(dǎo)體材料、微電子技術(shù)、太陽能、LED、電子器件、儀器儀表、新型材料、新能源技術(shù)、生物技術(shù)、藥業(yè)、食品類、化工廠、汽車制造等領(lǐng)域。設(shè)計專業(yè)、施工、組裝、調(diào)節(jié)、凈化室耗品、過濾水系統(tǒng)軟件等各種各樣凈化工程一站式服務(wù)。公司自創(chuàng)立至今，本著心懷感恩、開拓創(chuàng)新、忠誠初心、做高品質(zhì)新項目的行業(yè)核心理念，一直堅持用心基本建設(shè)清理區(qū)域的重任，通過十幾年的勤奮，累積了充足的工作經(jīng)驗。以強悍的工程設(shè)計能量和經(jīng)濟實力，建立了一批技術(shù)性強勁的設(shè)計方案和施工精英團隊。現(xiàn)階段，公司有著中國領(lǐng)先的彩鋼夾芯板生產(chǎn)流水線，年生產(chǎn)能力80萬平方；大規(guī)格型號粗、中、高效送風(fēng)口等凈化設(shè)備。憑著優(yōu)良的產(chǎn)品品質(zhì)和一流的售后維修服務(wù)，公司依次為全國各地300好幾家生產(chǎn)廠家修建了凈化車間。