微生物實驗室培養

微生物實驗室一般實驗室工程和凈化工程不同。一般由主體實驗室和輔助功能實驗室組成，設計方案也與其他實驗室大不相同。

微生物安全實驗室必須保證人身安全、環境安全、廢棄物安全和樣品安全，可以長期安全運行，同時為實驗室工作人員提供舒適、良好的工作環境。

微生物實驗室概況

食品微生物實驗室主要負責各種微生物項目的檢查，主要檢查項目有菌落總數、大腸菌群、霉菌、酵母、乳酸菌、雙歧桿菌、罐頭商業無菌、致病菌(沙門氏菌、志賀氏菌、溶血性鏈球、金黃色葡萄球菌等)。

微生物實驗室由準備室、洗滌室、滅菌室、無菌室、恒溫培養室和普通實驗室六部分組成。這些房間的共同特點是地板和墻壁質地光滑硬，儀器和設備陳設簡潔，易于清潔。

三級生物安全防護實驗室可以與其他用途的房屋設置在建筑物中，但必須設置區域。該區通過隔離門與公共走廊或公共部分相隔。

1.三級生物安全防護實驗室的核心區域包括實驗間和相連的緩沖間，緩沖間形成進入實驗間的通道。必須設置兩個連鎖門，其中一個門打開時，另一個門自動關閉。使用電動連鎖裝置時，斷電時必須打開兩扇門。在緩沖間可以進行二次更衣的實驗室通風系統不設置自動控制裝置時，緩沖間面積不得過大，不得超過實驗間面積的八分之一的ii級或iii級生物安全柜的設置遠離實驗間入口，避免員工頻繁移動的區域，有助于形成氣流從清潔區域流向污染區域的氣流型。

備用室用于調配培養基和樣品處理等。室內設有試劑柜、儲存器具或材料的柜臺、實驗臺、電爐、冰箱和上下水道、電源等。

洗滌室用于洗滌器具等。因為使用過的容器被微生物污染，所以有時也有病原微生物。因此，在條件允許的情況下，最好安裝洗衣間。室內需要加熱器、蒸鍋、洗盤用的盆、桶等，還需要各種瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等。

滅菌室主要用于培育基礎的滅菌和各種器具的滅菌，室內需要高壓蒸汽滅菌器、烤箱等滅菌設備和設施。

無菌室又稱接種室，是系統接種、純化菌種等無菌操作的專用實驗室。微生物工作中，菌種接種移植是主要操作，該操作的特點是保證菌種純種，防止雜菌污染。在一般環境的空氣中，由于灰塵和雜菌很多，容易造成污染，對接種子的工作受到很大的干擾。

1.無菌室安裝

無菌室應按經濟科學原則安裝。其基本要求如下:

(1)無菌室應有內外兩個，內外無菌室，外外外緩沖室。房間容積不要太大，以便空氣滅菌。最小內間面積2×2.5=5m2，外間面積1×2=2m2，高度最好在2.5m以下，需要天花板。

(2)內部應設置拉門，以減少空氣波動，門應設置在離工作臺最遠的位置。外部門最好也使用拉門，設置在距離內部最遠的位置。

(3)在分隔內外的墻壁和隔扇上，打開小窗戶，制作接種過程中必要的內外傳遞物品的通道，減少人進出內外的次數，降低污染程度。小窗寬60cm，高40cm，厚30cm，內外掛對拉的窗扇。

(4)無菌室容積小而嚴密，使用一段時間后，室內溫度高，應設置通風窗。通氣窗應設置在室內入口的天花板上(即離工作臺最遠的位置)，最好是雙層結構，外層為百葉窗，內層可以使用板式窗。通風窗在室內使用后，在滅菌前打開，可以流通空氣。有條件可以安裝恒溫恒濕機。

2.無菌室內設備和工具

(1)無菌室內桌面，無論是什么材質、用途，都要求表面光滑和桌面水平。

(2)在內室和外室各設置紫外線燈(多為30W)。內室的紫外線燈應安裝在經常工作的座位正上方，離地面2m，外室的紫外線燈可安裝在外室的中央。

(3)外室需要專用的工作服、鞋子、帽子、口罩、盛蘇兒水的瓷盆和毛巾、噴霧器和5%的煤酸溶液等。

(4)室內需要酒精燈、常用接種工具、不銹鋼刀、剪刀、鑷子、70%酒精棉球、工業酒精、玻璃片、特殊蠟筆、記錄本、鉛筆、標簽紙、膠水、廢棄物籃等。

3.無菌室滅菌消毒

(1)薰衣草:這是無菌室徹底滅菌的措施。無菌室長期使用，污染嚴重時，應進行熏蒸滅菌。可用甲醛、乳酸或硫磺熏蒸。

(2)噴霧:每次使用無菌室前進行。噴霧可以促進空氣中的微粒子和微生物沉降，防止桌面和地面的微塵飛場，具有殺菌作用。可以用5%的煤酸噴霧。

(3)紫外線照射:每次使用無菌室前進行。紫外線具有良好的殺菌效果。通常打開紫外線燈照射30~60min。

4.無菌室工作規程

(1)無菌室滅菌。每次使用前打開紫外線燈照射30min以上，或者使用前30min，向內外室噴射5%的煤酸。

(2)用肥皂洗手后，將必要的設備移動到外室，在外室更換滅菌的工作服、帽子和鞋子，戴上口罩，用2%的煤酚肥皂液洗手2分鐘。

(3)將各種需要的物品轉移到室內清點、位置，用5%的煤酸在桌子上和操作員的站點空間噴霧，返回室外，5~10分鐘后進入室內工作。

(4)接種操作前，用70%的酒精棉球擦手無菌操作時，動作緩慢，盡量減少空氣變動和地面灰塵。

(5)工作中應注意安全。如果棉塞著火，用手握住或用濕布包起來熄滅，不要用嘴吹，以免燃燒擴大；如果有菌培養物灑落或打碎有菌容器，用浸潤5%的碳酸抹布包起來，用浸潤5%的碳酸抹布擦拭桌面或地面，用酒精棉球擦拭手后繼續操作。

(6)工作結束后，立即收拾桌面，將無菌室保管的物品和廢棄物全部取出無菌室后，在無菌室噴霧5%的煤酸，或者打開紫外線燈照射30min。

1.培養室的設置

(1)培養室應有內外兩個，內外兩個，內外兩個是緩沖室。房間容積不應大，有利于空氣滅菌，室內面積應在3.2×4.4=14m2左右，室外面積應在3.2×1.8=6m2左右，高度應在2.5m左右。

(2)分隔室內和室外墻壁的上部應設置空氣過濾裝置的通風口。

(3)為了滿足微生物對溫度的需要，必須設置恒溫恒濕機。

(4)內外室在室中央設置紫外線燈，用于滅菌。

2.培養室內設備和工具

(1)室內通常配備培養架和搖動機(搖動床)。常用的搖瓶機有旋轉式、往復式兩種。(2)外室應有專用工作服、鞋子、帽子、口罩、手持噴霧器和5%煤酸溶液、70%酒精棉球等。

3.培養室滅菌、消毒

同無菌室滅菌、消毒措施。

小規模培養不啟用恒溫培養室，在恒溫培養箱中進行。

微生物實驗室設計方案！

微生物觀察、計數和生理生化測量的場所。室內陳設因工作側重點不同而有很大差異。一般配備實驗臺、顯微鏡、櫥柜和工具。實驗臺要求平整光滑，實驗箱要充分容納日常使用的工具和藥品等。

是進入無菌室前工作人員更衣、洗手的地方。在室內設置無菌室和緩沖室的電源控制開關，放置無菌操作時穿的工作服、鞋子、帽子、口罩等。

注冊待檢樣本；出具檢驗報告；辦理相關文件；放松休息等

1.必須安裝獨立的通風空調系統來控制實驗室的氣流方向和壓力。該系統必須確保實驗室的使用，室內空氣除了通過排氣管道高效過濾排出外，不得從實驗室的其他部位和間隙排出到室外，同時確保實驗室內的氣流從清潔區域流向污染區域。進風口和排風口的布局應使實驗區內的死亡空間最小化。

2.通風空調系統為直排系統，不得采用部分回風系統。

3.環境參數:與實驗室外部相比，實驗室內部保持負壓。實驗室的相對壓力最好是-30Pa~-40Pa，緩沖室的相對壓力最好是-15Pa~-20Pa。實驗室內的溫濕度最好控制在人體的舒適范圍內，或者根據工藝要求來決定。實驗室內空氣清潔度最好是GB50073-2001《清潔現場設計規范》中定義的7級到8級。實驗室人工照明均勻，不耀眼，照度在500lx以上。

4.為確保實驗室內的氣流從清潔區域流向污染區域，實驗室內不得使用雙側均勻分布的排氣口布局。不宜采用上送上排的通風設計。生物安全柜排出的經內部高效過濾的空氣以通過系統的排氣管直接排出到大氣中，也可以送入建筑物的排氣系統。應確保生物安全柜與排風系統的壓力平衡。

5.實驗室進風應經初、中、高效三級過濾。

6.實驗室排風必須經過高效過濾或其他方法處理后，以不低于12m/s的速度直接排到空中。該排氣口應遠離系統進氣口的位置。處理后的排風也可排入建筑物的排風管道，但不得返回該建筑物的任何部位。

7.進風和排風高效過濾器必須安裝在實驗室設置在圍護結構的風口上，以免污染管道。

8.在實驗室的通風系統中，應在進氣和排氣總管處安裝氣密型調節閥，必要時可完全關閉室內化學熏蒸消毒。

9.實驗室通風系統所使用的所有部件都必須是氣密型。使用的高效過濾器不得為木框架。

10.必須設置鼓風機啟動自動連鎖裝置，確保實驗室啟動時打開排氣扇后打開鼓風機。關閉時關閉鼓風機后關閉排氣扇